抗體是一種由效應B細胞分泌的免疫球蛋白，協(xié)助免疫系統(tǒng)鑒別、中和抗原或其他外來物質。單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。

21世紀隨著生物技術，分子克隆技術，細胞培養(yǎng)技術及免疫治療，免疫學的快速發(fā)展，單克隆抗體也進入了快速發(fā)展期，在腫瘤治療及免疫療法中單克隆抗體發(fā)揮極其重要的作用。

單克隆抗體制備工藝中，下游工藝占整個工藝成本的60%以上，下面系統(tǒng)全面的介紹單克隆抗體的下游工藝解決方案。

用于腫瘤治療及免疫療法的單克隆抗體工藝趨于成熟，人源或人源化的單抗，由CHO細胞培養(yǎng)分泌獲得。CHO細胞用蘇州藍曉生物科技的Seplife LX-MC-dex1微載體培養(yǎng)。微載體培養(yǎng)是目前公認最具發(fā)展前途的一種動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術，其兼具懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點，且容易放大。藍曉科技的微載體廣泛應用在疫苗、單抗、基因治療病毒載體等生物制品的大規(guī)模生產中，藍曉科技自主研發(fā)的Seplife LX-MC-dex1細胞培養(yǎng)微載體幾乎適合所有貼壁細胞（如Vero、CHO、293T及MDCK等），細胞可貼附微球 2D 表面生長，1g的Seplife LX-MC-dex1微載體提供 4400 cm2的表面積給細胞貼附。

圖2：Seplife LX-MC-dex1細胞培養(yǎng)微載體培養(yǎng)效果

CHO細胞培養(yǎng)后先經過離心的方式去除細胞及細胞碎片，也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質經親和層析捕獲，把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質。親和層析捕獲后，進一步用強陽離子交換層析SP Seplife Large Scale層析介質繼續(xù)純化捕獲的單抗，進一步去除少量的HCP,HCD及第1步親和層析捕獲時rProtein A親和介質脫離的親和配基rProtein A。強陽離子交換層析后，通過調pH的方式用pH3.7-3.8的環(huán)境進行病毒滅活。低pH病毒滅活后，在通過陰離子交換層析Q Seplife Large Scale流穿模式，讓單抗流穿，層析介質吸附痕量的雜質進一步純化。陰離子交換層析后，可以通過超濾的方式進行濃縮。濃縮再用20nm的納濾膜過濾除病毒。除病毒后就進入制劑階段。隨著技術和材料的發(fā)展，單抗下游工藝解決方案也呈現(xiàn)出多樣性。

圖3：單抗下游工藝的多樣性

單抗下游純化工藝-經典工藝

圖4：單抗下游純化工藝經典工藝過程

圖5：rProtein A親和介質純化蛋白原理圖

Protein A是金黃色葡萄球菌表面的蛋白，分子量42kDa，有5個不同的結構域可以結合IgG的Fc片段，具有很強的特異性親和力，每個Protein A分子至少可以結合兩個IgG分子。

隨著技術的發(fā)展，重組Protein A在不斷的改進，目前用于單抗捕獲的rProtein A多點和瓊脂糖微球等填料基質偶聯(lián)，減少了使用過程中配基脫落，同時為滿足生物制藥工藝消毒的要求，可以耐受0.1-0.5M氫氧化鈉的處理。

圖6：rProtein A純化單抗的過程

圖7：rProteinA親和介質連續(xù)流層析過程示意圖

Protein A親和層析捕獲工藝流程可參考上面圖片的工藝流程，同時我們要系統(tǒng)的設計實驗方案，基于淋洗條件，洗脫方式，保留時間等要系統(tǒng)的利用DOE實驗開發(fā)最佳工藝過程。

rProteinA Seplife Suno

性能參數(shù)

rProteinA Seplife Suno

載量與駐留時間的關系

rProteinA Seplife Suno

和國外品牌對比

rProteinA Seplife Suno

訂購信息

更多單抗純化填料請聯(lián)系蘇州藍曉銷售人員

CHO細胞培養(yǎng)微載體

Seplife LX-MC-dex1

親和介質

rProtein A Seplife Suno

離子交換介質

Q/SP Seplife Large Scale

混合模式層析介質

MA Seplife Large Scale

凝膠過濾層析介質

Seplife S-100/S-200

蘇州藍曉生物科技有限公司是藍曉科技（股票代碼：SZ 300487）全資子公司，依托藍曉科技20多年在分離吸附材料領域豐富的經驗和技術積累，在后疫情時代及藥品集采的時代背景下應運而生。蘇州藍曉生物科技，在藍曉科技雄厚資本的支持下，在藍曉科技生命科學事業(yè)部數(shù)10年產品研發(fā)和技術積累的基礎上，匯聚50多人的研發(fā)團隊，提供從細胞培養(yǎng)及分離純化到系統(tǒng)裝置完整的解決方案，我們將全力助力生命科學及生物制藥產業(yè)的高質量發(fā)展。