北海Seplife G75 M

基本信息

Seplife G75 M葡聚糖層析介質(zhì)是一種具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物，它是由葡聚糖加入交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷通過(guò)醚鍵互相交聯(lián)聚合而成，交聯(lián)度越大，網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)就越緊密，吸水后的體積膨脹就越小，能允許進(jìn)入層析介質(zhì)內(nèi)部的分子的分子量也就越小，反之亦然。層析時(shí)，大于層析介質(zhì)孔徑的大分子，被阻于凝膠相外，沿著層析介質(zhì)顆粒之間的間隙走，下移速度最快，故最先洗脫下來(lái)，中等大小的分子進(jìn)入部分層析介質(zhì)孔中，洗脫速度次之，而小分子因?yàn)槟軌蜻M(jìn)入全部層析介質(zhì)孔中……

產(chǎn)品描述
產(chǎn)品屬性參數(shù)
說(shuō)明書
訂貨信息

產(chǎn)品牌號(hào)	Seplife G75 M
外觀	白色球狀，無(wú)臭無(wú)味
粒徑（干，μm）	40～120
溶脹度	12~15
分離范圍	3000~8×104
耐壓	遵從Darcy 定律
流速	遵從Darcy 定律
pH穩(wěn)定性	2~10
應(yīng)用	適用于脫鹽、多肽分離、清洗生物提取液、分子量測(cè)定

使用方法

3.1預(yù)處理

葡聚糖凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)一般是干粉狀態(tài)，使用前必須在過(guò)剩的緩沖溶液（蒸餾水）中進(jìn)行溶脹（室溫溶脹過(guò)夜，或者在沸水中溶脹1h，避免使用磁力攪拌、藥匙或者玻璃棒攪拌造成填料損壞）。溶脹后，使用緩沖液進(jìn)行調(diào)節(jié)，形成濃稠的漿液，75%（體積百分比）左右，再進(jìn)行脫氣。

注：在溶脹前加入緩沖溶液（蒸餾水）使其自然沉降，自然沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒多，需要重復(fù)多次漂洗將其除去，防止層析時(shí)阻塞凝膠柱，影響流速。

3.2 裝柱

裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.3平衡

使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子，務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。

3.4上樣

（1）介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的，分子量大的先流出來(lái)。

（2）凝膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50 cm 以下，過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5：1即可。

（3）樣品中如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)該在上樣前過(guò)濾或離心除去，樣品的粘度不能過(guò)高，否則影響分離效果。

3.5洗脫

可以采用無(wú)鹽水，也可以采用用平衡緩沖液做洗脫劑進(jìn)行洗脫。在平衡緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或者鹽梯度洗脫都可以完全分離。

3.6在位清洗

凝膠使用10次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗4個(gè)柱床體積，再以至少3個(gè)柱床體積平衡緩沖液再生。

3.7存儲(chǔ)

干粉保存在4~30℃，干燥、通風(fēng)、清潔處；溶脹后的介質(zhì)保存在4~8℃，20%乙醇溶液中，避免與氧化劑接觸，不可冷凍。

3.8運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

4.注意事項(xiàng)

（1）樣品必須澄清沒有顆粒。

（2）樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進(jìn)行柱層析。