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          rProtein A Seplife Suno親和層純化后HCP含量偏高,如何優(yōu)化

          2022-05-19 09:45:49

          a.HCP(宿主細(xì)胞蛋白)和介質(zhì)之間非特異性結(jié)合引起,上樣后,淋洗方面優(yōu)化:1.pH(7.0-4.5梯度)+150mM NaCl淋洗3-5CV;2.平衡液+0.1-1 M精氨酸淋洗3-5CV;3.平衡液加0.1-1M GdnHCl (鹽酸胍)淋洗3-5CV;4.平衡液加0.5-3M Urea(尿素)淋洗3-5CV;5.平衡液加0.5-1% Tween-80淋洗3-5CV;6.平衡液加0.1-1% Triton X-100淋洗3-5CV;7.弱洗脫,將洗脫液的pH適當(dāng)提高,加0.5M精氨酸洗脫

          b.HCP和目標(biāo)分子間的非特異性作用力引起的純化后HCP含量高,a,上樣后,用Ph8-10的緩沖液淋洗3-5CV,b,將平衡液及上樣液的pH提高到8-10.


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