重慶蛋白純化廠家供應(yīng)
發(fā)布時間：2022-06-21 01:58:34
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Glutathione Seplife 4FF層析介質(zhì)是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì)，是將谷胱甘肽配基偶聯(lián)到4%高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上，這種偶聯(lián)方式使得介質(zhì)對GST-tagged蛋白和其他谷胱甘肽結(jié)合蛋白有更強的結(jié)合能力。該層析介質(zhì)具有結(jié)合載量高、流速快、反壓小的特點，方便進行工業(yè)化大規(guī)模純化，可有效提高生產(chǎn)效率。
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在層析過程要對樣品做足夠的認(rèn)知，包括樣品的濃度，樣品的組成等做一定的了解，如真核細胞分泌表達的樣品，要了解其上游工藝，培養(yǎng)基組成，培養(yǎng)過程等的一些添加劑是否對填料的性能及壽命衰減會有影響，及樣品的酸堿度，離子強度，濁度等做足夠的了解，必要的時候要進行再次澄清處理及體系置換。
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生物分子與親和層析介質(zhì)上的配體通過共價鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發(fā)生生物學(xué)專一性結(jié)合形成復(fù)合物，共價鏈接在載體表面的功能團配體上。蛋白質(zhì)親和層析技術(shù)通過目標(biāo)蛋白質(zhì)與配體間通過特異性親和力吸附而達到分離純化的目的，具有生物專一性的特點，純化效率高。
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CHO細胞培養(yǎng)后先經(jīng)過離心的方式去除細胞及細胞碎片，也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質(zhì)經(jīng)親和層析捕獲，把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質(zhì)。
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DEAE-52和DEAE-FF有什么區(qū)別：兩者都是弱陰離子填料。DEAE-52是纖維素基質(zhì)，平均粒徑50um，DEAE-FF是瓊脂糖基質(zhì)，中心粒徑90um。同樣的上樣流速前者反壓明顯大于后者，無法滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求，現(xiàn)在市面上很少有提供DEAE-52的，工業(yè)化生產(chǎn)都在用DEAE-FF或者更高剛性的，兩者選擇的話，強烈推薦使用DEAE-FF。
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親和層析介質(zhì)是一種根據(jù)生物分子之間的特異相互作用來分離蛋白的層析方法，如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的，通過這種可逆的結(jié)合和分離來達到蛋白純化的目的