貴州蛋白純化廠家供應(yīng)
發(fā)布時間：2023-05-14 01:49:05
貴州蛋白純化廠家供應(yīng)
Plasmid Seplife LX，絲氨酸蛋白酶純化親和層析介質(zhì)：苯甲脒類物質(zhì)是絲氨酸蛋白酶的廣譜抑制劑，將這類物質(zhì)偶聯(lián)到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上，可以從各種來源的樣品中進(jìn)一步胰蛋白酶，凝血酶，尿激酶，激肽釋放酶，前激肽釋放酶等絲氨酸蛋白酶。
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洗脫峰雜質(zhì)多，可能原因：非特異性結(jié)合，清洗不徹底，降解等。解決方法：蛋白純化過程加蛋白抑制劑防止降解，上樣完后要徹底清洗，加一定的NaCl和咪唑減少非特異性結(jié)合。使用幾次后，介質(zhì)結(jié)合效率降低，柱效降低。可能原因：介質(zhì)上沉積大量雜質(zhì)等。解決方法：徹底清洗，IDA/IMAC脫鎳再生處理。
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疏水作用層析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根據(jù)分子表面疏水性差別來分離蛋白質(zhì)和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。由于蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)受到不同緩沖液環(huán)境的影響，而發(fā)生立體結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。疏水層析填料利用這種結(jié)構(gòu)的改變，在含鹽的水溶液體系中，借助于層析填料與蛋白質(zhì)分子之間的疏水作用達(dá)到吸附活性蛋白分子的目的，這種層析技術(shù)稱為疏水作用層析。
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樣品的認(rèn)知：在層析過程要對樣品做足夠的認(rèn)知，包括樣品的濃度，樣品的組成等做一定的了解，如真核細(xì)胞分泌表達(dá)的樣品，要了解其上游工藝，培養(yǎng)基組成，培養(yǎng)過程等的一些添加劑是否對層析填料的性能及壽命衰減會有影響，及樣品的酸堿度，離子強(qiáng)度，濁度等做足夠的了解，必要的時候要進(jìn)行再次澄清處理及體系置換。