吉林層析介質(zhì)聯(lián)系電話地址
發(fā)布時間:2023-04-23 01:50:01
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DEAE-52和DEAE-FF有什么區(qū)別:兩者都是弱陰離子填料。DEAE-52是纖維素基質(zhì),平均粒徑50um,DEAE-FF是瓊脂糖基質(zhì),中心粒徑90um。同樣的上樣流速前者反壓明顯大于后者,無法滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求,現(xiàn)在市面上很少有提供DEAE-52的,工業(yè)化生產(chǎn)都在用DEAE-FF或者更高剛性的,兩者選擇的話,強烈推薦使用DEAE-FF。

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由細胞的貼壁、生長狀態(tài)、細胞密度及消化后重新貼壁情況觀察可以得出,Vero細胞在藍曉科技微載體Seplife LX-MC-Dex1上能夠生長,胰酶消化后細胞分散情況符合標準,是病毒類生物制品制備之利器。層析介質(zhì)國產(chǎn)化替代,藍曉科技有多糖微球介質(zhì),大孔聚合物微球介質(zhì),多模式介質(zhì)等,全力助力生物制品下游工藝過程中層析介質(zhì)的國產(chǎn)化替代。

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建立蛋白質(zhì)純化工藝時,最重要的是需要考慮純化得到的蛋白質(zhì)應能滿足其后續(xù)應用要求。蛋白質(zhì)的含量及純度都必須滿足應用要求。而且,因為后續(xù)應用需要的是保持良好折疊結(jié)構(gòu)的活性蛋白質(zhì),因此蛋白質(zhì)活性的相關(guān)信息也需要考慮。在純化及后續(xù)的保存過程中,很多處理方法都會對蛋白質(zhì)的性質(zhì)產(chǎn)生影響,如蛋白質(zhì)的去折疊、聚集、降解和失活等。制定詳細計劃,在最短時間內(nèi)完成蛋白質(zhì)純化,并在最穩(wěn)定的條件下進行保存才算是成功地完成了其整個純化過程。

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CHO細胞培養(yǎng)后先經(jīng)過離心的方式去除細胞及細胞碎片,也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質(zhì)經(jīng)親和層析捕獲,把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來,此步驟可以去除大量的HCP,單抗去折疊片段,病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質(zhì)。

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親和層析捕獲后,進一步用強陽離子交換層析SP Seplife Large Scale層析介質(zhì)繼續(xù)純化捕獲的單抗,進一步去除少量的HCP,HCD及第1步親和層析捕獲時rProtein A親和介質(zhì)脫離的親和配基rProtein A。強陽離子交換層析后,通過調(diào)pH的方式用pH3.7-3.8的環(huán)境進行病毒滅活。低pH病毒滅活后,在通過陰離子交換層析Q Seplife Large Scale流穿模式,讓單抗流穿,層析介質(zhì)吸附痕量的雜質(zhì)進一步純化。

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GST標簽蛋白純化親和層析介質(zhì):谷胱甘肽配基是通過12個原子連接臂偶聯(lián)到4%的高流速瓊脂糖層析介質(zhì)上,這種偶聯(lián)使得介質(zhì)對GST-tag融合蛋白和其他谷胱甘肽結(jié)合蛋白有更強的結(jié)合能力,介質(zhì)的高蛋白載量和良好的流速性能使大規(guī)模生產(chǎn)簡單直接。